孔雀石绿快速检测试剂盒使用前，先看看这个！

1．检测样本若浑浊应过滤后使用．

2．现场检测出的阳性样品应采用孔雀石绿速测试剂盒(Ⅱ型) 进行确认或采用液相色谱法测定。

3．孔雀石绿标准工作液的使用：本试剂盒提供的标准工作液可提供初学者训练。标准工作液浓度为75ug/ml，用前可取水50mL加入1滴标准工作液即得到稀释到0.075ug／mL的孔雀石绿溶液。取15ml稀释液通过富集柱，富集柱的填料中有明显的绿色出现．

 

孔雀石绿快速检测试剂盒概要

孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿，其既是杀真菌剂，又是染料，易溶于水，溶液呈蓝绿色。长期以来，渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等，而且为了使鳞受损的鱼延长生命，在运输过程中和存放池内，也常使用孔雀石绿。研究显示，孔雀石绿在鱼内残留时间很长，且其具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，鉴于此，许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。

 

孔雀石绿快速检测试剂盒采用竞争酶标免疫法，可经济、快速地检测鱼、虾等样品中的孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫等残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能大限度地减少操作误差和工作强度。

 

孔雀石绿快速检测试剂盒原理

孔雀石绿检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，同时把隐性孔雀石绿氧化成孔雀石绿，检测鱼、虾以及鱼池或鱼缸水样中的总的孔雀石绿（Malachite Green ，MG），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的孔雀石绿和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗孔雀石绿抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含孔雀石绿含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中孔雀石绿的残留量。

 

【样品处理】

一、 水样：用滴管直接吸取水样进行检测。

二、组织样（虾要去掉头和壳后*洗净，鱼要去鳞后洗净）

1、取切碎的一定量的组织样本，用均质器均质；

2、称取3ｇ已均质样本至15ml离心管中；加入2ml提取剂A，3ml提取剂B，一管氧化剂，在漩涡震荡仪上充分振荡混匀3min，或手摇5min,4000r/min离心5min。

3、取上清1ml于5ml离心管中，加两滴助溶剂。

4、摇晃均匀后,65℃水浴下，氮（空）气吹干。

5、加入0.2ml底物复溶液溶洗涤离心管（冲洗完成后立即进行步骤6，间隔时间切勿超过3分钟）。

6、吸取待检样本溶液0.1ml（约三滴）于金标微孔中，用复溶液滴管轻轻吹打至孔内红色物质*溶解，等待反应5分钟。

 

【使用步骤】

1.测试前先完整阅读使用说明书，使用前将试剂板和待检样本溶液回复至室温（20℃-30℃）；

2.从原包装袋中取出检测卡，水平放置于观察者正面（打开后立即使用）；

3.吸取金标微孔中的所有溶液加至加样孔中（见下图），加样后开始计时；

4.结果应在 5 - 8 分钟读取，其他时间判读无效。